Organe rhoptry ale paraziților apicomplexan, Apicomplexan invazia celulelor gazdă de către paraziți. Paraziți intracelulari helmintici


Omologii proteinei legați de reticulocite RH și proteinele de legare a eritrocitelor EBL sunt evacuate din organele specializate și utilizate în etapele timpurii ale invaziei. Aici arătăm că anticorpii monoclonali împotriva invaziei de merozoiți din blocul PfRH1 RH organe rhoptry ale paraziților apicomplexan inhibarea specifică a semnalizării calciului în parazit, în timp ce anticorpii monoclonali organe rhoptry ale paraziților apicomplexan inhibă invazia care vizează EBA o proteină EBL nu au efect asupra semnalizării.

Mai departe, vom arăta că inhibarea acestei semnalizări de calciu previne descărcarea EBA și astfel formarea joncțiunii dintre parazit și celula gazdă. Rezultatele noastre indică faptul că PfRH1 are un rol inițial de detectare și de transducție a semnalului care conduce la eliberarea ulterioară a EBA Ele oferă, de asemenea, noi perspective asupra modului în care interacțiunile celulei gazdă RH conduc la evenimente esențiale de semnalizare în aval ale parazitului, sugerând noi ținte pentru intervenția malariei.

Apicomplexan invazia celulelor gazdă de către paraziți - Paraziți intracelulari helmintici

Introducere Plasmodium falciparum P. Invazia eritrocitelor este un proces complex în mai multe etape care este mediată de interacțiunile specifice între receptorii gazdă și liganzii paraziți.

organe rhoptry ale paraziților apicomplexan papiloma no palato duro

Formarea de legături între merozoit și eritrocite este un pas organe rhoptry ale paraziților apicomplexan care permite parazitului să se lege ireversibil la gazdă, urmată de activarea sistemului său de mașini organe rhoptry ale paraziților apicomplexan motor care conduce complet parazitul în eritrocite 1.

Studiile anterioare sugerează implicarea organelor secretoare apice numite rhoptries și micronemes 2.

La speciile Plasmodiumun număr de liganzi cheie paraziți care mediază interacțiunile critice cu receptorii gazdă în timpul invaziei sunt localizați în aceste organele apice 1.

RHs și EBL s-au dovedit a avea un rol crucial în recunoașterea și senzația de celule gazdă, precum și în virulența 4.

În EBL, un domeniu de tip duffy-like-like DBL mediază legarea specifică la diferiți receptori de celule gazdă 5 incluzând glicophorinele A, B și C, precum și antigenul grupului sanguin Duffy 3. În RH, regiunile precise de legare a eritrocitelor sunt încă delimitate 4, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 ; completarea receptorului 1 CR1 și basigina au fost identificați a fi receptorii pentru PfRH4 ref.

Deși RHs au ulei de ricin pentru detoxifiere propuși pentru a avea un rol primordial în detectarea celulelor gazdă 16, 17, EBLs se crede că au un rol direct în formarea joncțiunilor Acest lucru sugerează că sensibilizarea RH și interacțiunea ulterioară cu o eritrocită gazdă adecvată trimite un semnal la merozoitul care declanșează etapele organe rhoptry ale paraziților apicomplexan de invazie 4.

Remedii ayurvedice impotriva parazitilor intestinali

Se arată că mAb PfRH1 blochează invazia merozoitului prin inhibarea specifică a semnalizării calciului în parazit, mai degrabă decât prin interferența directă cu legarea eritrocitară a parazitului.

Mai mult, arata ca inhibarea acestei semnalizari a calciului previne evacuarea EBA si astfel previne formarea jonctiunii un pas esential care permite parazitului sa penetreze eritrocita folosind un motor actin-myosin 3. Rezultatele noastre demonstrează că PfRH1 și EBA au funcții distincte, PfRH1 având un rol inițial de detectare și transducție a semnalului care conduce la eliberarea ulterioară a EBA de la micronă și la formarea joncțiunii. Aceste informații noi ar putea ajuta la identificarea unor noi ținte pentru intervenția împotriva malariei.

Rezultate Mărimile specifice PfRH1 inhibă invazia merozoitului În această lucrare, folosim PfRH1 pentru a studia evenimentele cheie de semnalizare intracelulare care duc la o invazie reușită a eritrocitelor. Aici am generat patru anticorpi monoclonali mAbs: C49, C41, C2 și C50 împotriva acestei regiuni și am validat specificitatea lor folosind teste western blot și imunofluorescență. Toți anticorpii recunosc formularul așteptat de și kDa prelucrat de PfRH1 în supernatantul culturii de parazit T, extractele merozoite și schizont, în timp ce în linia de decupare TΔRH1 a PfRH1 nu s-au detectat benzi echivalente Figura complementară S1a-c.

Testele de imunofluorescență au arătat că toate mAb-urile dau tipare punctuale care sunt parțial localizate cu EBA o proteină micronemă cunoscută la capătul apical al merozoitilor în T, în concordanță cu locația așteptată a PfRH1 Figura suplimentară S1d.

Apicomplexan invazia celulelor gazdă de către paraziți. Paraziți intracelulari helmintici

Imagine de dimensiune completă Pentru a stabili dacă diferite mAb au fost capabile să inhibe invazia merozoit, s-au efectuat teste de inhibare cu creșterea concentrației de anticorpi utilizând T și TΔRH1 Fig. Am constatat că mAbs C2 și C50 nu au un efect semnificativ asupra invaziei, în timp ce atât mAb, C49 și C41, inhibă invazia într-o manieră dependentă de doză în T Pentru a se asigura că efectul de inhibare a invaziei nu este datorat mărimii mari a mAb care ar putea conduce la un efect secundar de blocaream purificat fragmentul Fab al mAb C41 exemplul suplimentar S2c, inserat și am testat inhibarea invaziei 20, Fab fragmentul C41 purificat blochează în mod semnificativ invazia într-o manieră dependentă de doză în paraziți T Figura complementară S2cconfirmând că mAb C41 vizează direct PfRH1.

Inhibitorii mAbs blochează invazia înainte de formarea joncțiunilor Merozoita inhibarea invaziei de către anticorpi este adesea cauzată de anticorpi care interferează direct cu legarea parazitului la receptorul său.

organe rhoptry ale paraziților apicomplexan human papillomavirus warts hands

Prin urmare, am evaluat capacitatea diferitelor mAb de a inhiba legarea PfRH1 la eritrocite. Ambii mAb ne-inhibitori C2 și C50 și mAb inhibitori C49 și C41la concentrații 0, 3 mg ml- 1 demonstrat a inhiba eficient invazia merozoitului Fig.

Mărimea fiecărui fragment a fost confirmată utilizând mAbs anti-His-tag Fig. Suplimentar S3f.

Paraziți de specii simetrice, Examen coproparazitologic | Synevo

Pe baza rezultatelor Western blot, am sintetizat în continuare șase peptide care se suprapun Imaginea suplimentară S3g. MAbs inhibitorii C41 și C49, precum și mAb C2 neinhibitor, recunosc aceeași peptidă de 15 meri, în timp ce un alt mAb ne-inhibitor C50 recunoaște o peptidă diferită Figura suplimentară S3h. Este oarecum surprinzător faptul că mAb neinhibitor și inhibitor recunosc aceeași peptidă; cu toate acestea, deoarece un epitop este lung de aminoacizi, este posibil ca mai multe epitopi distinși să se afle în aceeași peptidă.

De fapt, studiile anterioare au arătat organe rhoptry ale paraziților apicomplexan mAbs împotriva epitopilor care sunt foarte apropiați unul de altul prezintă diferite efecte asupra funcțiilor celulare sau biologice 20, 21, Dimensiunile moleculare sunt indicate în stânga în kDa.

Întreruperea rutei post-scursă este indicată în fiecare instantaneu în secunde sec, alb. Un cerc alb punctat indică o schindă ruptătoare. Săgețile verzi indică merozoite. Un cerc roșu punctat în jurul unui eritrocitar este adăugat pentru a ajuta la urmărirea infecției.

Lccl proteine de paraziți apicomplexan

După invazia reușită, apare deformarea eritrocitelor infectate echinocitoză și cu 2 minute eritrocitele se recuperează la forma sa normală. Vedeți și filme suplimentare 1.

Merozoitele arestate în joncțiune au fost numărate microscopic. Inhibitorii mAbs C49 și C41 au blocat semnificativ formarea joncțiunii de merozoiți în T Am constatat că, în absența anticorpilor, merozoții recent eliberați atașează rapid, reorientează și invadează eritrocitele Fig.

Imediat după invazie, eritrocitele se contractă și apare echinocitoză, eritrocitele infectate recuperând forma în decurs de 2 minute. Interesant, în prezența anticorpilor inhibitori ai invaziei C49 fig.

Roptrie - Wikipedia

În contrast, invazia similară cu cea observată în absența oricărui anticorp este observată în prezența anticorpilor neinhibitori C2 Fig. Suplimentar S4b și Filmul suplimentar 4 sau C50 filmul suplimentar 5.

Nf-kb în imunobiologie cercetare celulara - Cercetare celulara - Lccl proteine de paraziți apicomplexan Omologii proteinei legați organe rhoptry ale paraziților apicomplexan reticulocite RH și proteinele de legare a eritrocitelor EBL sunt evacuate din organele specializate și utilizate în etapele timpurii ale invaziei. Nf-kb în imunobiologie cercetare celulara - Cercetare celulara - Oxiuros tratamiento perros Aici arătăm că anticorpii monoclonali împotriva invaziei de merozoiți din blocul PfRH1 RH prin inhibarea specifică a semnalizării calciului în parazit, în timp ce anticorpii monoclonali care inhibă invazia care vizează EBA o proteină EBL nu au efect asupra semnalizării. Mai departe, vom arăta că inhibarea acestei semnalizări de calciu previne descărcarea EBA și astfel formarea joncțiunii dintre parazit și celula gazdă. Rezultatele noastre indică faptul că PfRH1 are un rol inițial de detectare și de transducție a semnalului care conduce la eliberarea ulterioară a EBA Ele oferă, de asemenea, noi perspective asupra modului în care interacțiunile celulei gazdă RH conduc la evenimente esențiale de semnalizare în aval ale parazitului, sugerând noi ținte pentru intervenția malariei.

Incapacitatea merozoitului de a penetra eritrocitele în ciuda reorientării și a legăturii clare sugerează că anticorpii inhibitori interferează cu o etapă ulterioară a procesului de invazie.

Prin urmare, pentru a evalua dacă mAbs inhibă prevenirea formării joncțiunii, merozoii au fost opriți la joncțiunea strânsă prin tratamentul cu citochalazin D Cyto D Au fost efectuate experimente în absența și prezența mAb PfRH1, iar merozoții arestați prin joncțiune au fost numărați.

Luate împreună, aceste date demonstrează în mod clar că inhibitorii mAb inhibă invazia înainte de formarea joncțiunii și sugerează că PfRH1 ar putea avea un rol cheie de semnalizare înainte de formarea joncțiunii.

organe rhoptry ale paraziților apicomplexan cancer neoplasia maligna

Q1 verde reprezintă merozoiții liberi cu semnale Fluo-4 AM. Q2 verde reprezintă merozoizi invazivi cu semnale în creștere Fluo-4 AM. Q3 piersic reprezintă merozoiții liberi fără semnal. Q4 roz reprezintă merozoții atașați fără semnal. Melozoitii invadatori vor fi opriți de Cyto D după formarea joncțiunii, în timp ce merozoitele în prezența anticorpilor inhibitori se vor detașa sau vor rămâne atașați la RBC fără a forma o joncțiune.

Pe baza acestor criterii, există două populații distincte: merozoiți organe rhoptry ale paraziților apicomplexan și merozoiți legați de RBC. Merozoitele T și TΔRH1 din fiecare preparat invadează cu succes eritrocitele, iar invazia T este inhibată cu succes de către C41, dar nu și C2. În contrast, nici unul dintre anticorpi nu are niciun impact asupra invaziei în cazul TΔRH1 tabelul suplimentar S3. Luate impreuna, aceste date indica in mod clar ca merozoizii viabili de invazie care contribuie la semnale.

Paraziți de specii simetrice Inverting papilloma excision

Diamantele albastre reprezintă merozoși incubați cu eritrocite în absența mAbs RBC. Mierozoidele T proaspăt izolate au fost lăsate să invadeze eritrocite urmate de tratamentul cu heparină pg ml- 1 la momente diferite de timp minute cu interval de 2 minute pentru a inhiba invazia.

  • Tratamente complexe pentru viermi
  • Papilloma squamoso sulla lingua

După punctul final, culturile au fost incubate timp de 40 de ore, iar parazitemiile rezultate au fost analizate prin citometrie în flux. Barografiile arată inhibarea invaziei diferitelor concentrații 0,mg ml -1 ale mAb-ului specific EBA R în T Exprimarea de suprafață a EBA a fost observată sub microscopie tratamentul helmintiaziei la adulți și copii sau măsurată sub cititorul de plăci fluorescente.